HPLC色譜柱是設(shè)計用于為 HPLC 和 UHPLC 應(yīng)用提供可靠且可重現(xiàn)結(jié)果的色譜柱。產(chǎn)品在多種相中操作,有多種固定相和色譜柱尺寸可供選擇。包括分析、防護(hù)、阱和制備色譜柱。
色譜柱的柱效是非常重要的指標(biāo),一般都取決于固定相的性能和裝柱技術(shù)。一般HPLC的色譜柱固定相(填料)大致有三種:硅膠或以硅膠為基質(zhì)質(zhì)的填料、聚合物填料和無機(jī)物填料。正相色譜柱大多采用硅膠類填料,反相色譜柱則多采用以硅膠為基質(zhì)組成的官能團(tuán)類的填料。以聚合物為填料的色譜柱最大的特點是pH在1~14都能用;疏水性強(qiáng)。但無機(jī)填料色譜柱一般只是限于特殊用途,比較少用。
因為HPLC的樣品都為溶液,而溶液受溫度影響很大。例如:溫度對溶劑的溶解能力、色譜柱的柱效、流動相的黏度都會產(chǎn)生影響;如果溫度升高,可能會提高溶液在流動相中的溶解度,可以降低分配系數(shù)K;降低流動相黏度可以降低柱壓,有利于保護(hù)色譜柱,延長色譜柱的壽命。但是,溫度不能太高,否則會產(chǎn)生氣泡。
HPLC工作者還必須注意不同的溫度,對色譜柱的保留時間、分離效果會有影響;對檢測器的靈敏度也會有影響。特別是對示差折光器的靈敏度、最小檢出限的影響很大。所以,很多HPLC特別注意對恒溫系統(tǒng)的設(shè)計。這些都是HPLC設(shè)計者、使用者應(yīng)該重視的問題。